近日,华检测盟测试所(中广测)省化学测量与应急检测技术重点实验室环境化学研究团队联合中山大学、华北理工大学附属医院,研制出一种具有高选择性和高富集效率的环糊精聚合物固相微萃取(SPME)纤维,并将其与高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)联用,该技术基于多孔结构与主客体识别协同作用,可高效捕获血清中痕量嘌呤,实现对六种嘌呤代谢物的同步精准定量。
嘌呤是DNA和RNA的基本组成单元,在细胞能量代谢和信号转导中发挥关键作用。嘌呤代谢紊乱与高尿酸血症、痛风性关节炎、2型糖尿病等多种疾病密切相关。然而,血清中嘌呤的内源性丰度低、极性高,且基质干扰严重,传统蛋白沉淀结合HPLC-UV或LC-MS/MS的方法,主要去除蛋白质,无法选择性富集目标嘌呤,残存基质效应制约了检测的灵敏度与数据可靠性。
针对这一难题,研究团队开发出环糊精聚合物固相微萃取的样品前处理技术和HPLC-MS/MS快速检测方法(图1)。该技术具有操作简便、溶剂消耗低、富集效率高等特点。

图1:环糊精聚合物固相微萃取纤维的绿色样品制备流程示意
该纤维涂层兼具多孔结构(比表面积达318.9 m²/g)与环糊精疏水内腔的主客体识别双重协同作用:多孔结构提供充足的吸附位点,环糊精空腔选择性捕获嘌呤分子,二者协同实现对血清中六种嘌呤的高效富集;在相同条件下,其萃取效率相比商品化纤维具有更优越萃取效率(图2)。结合HPLC-MS/MS分析,可同步精准定量黄嘌呤、次黄嘌呤、黄苷、鸟苷、鸟嘌呤和腺嘌呤,方法检测限可达0.05 μg /L,加标回收率为77.0% ~ 112.0%,重现性良好,单次分析仅消耗80 μL有机溶剂,相比传统液相萃取大幅减少了有机溶剂使用量,为临床嘌呤代谢分析开辟了绿色高效新路径。
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